2024-09-05
Détermination de la teneur en aciclovir par chromatographie liquide à haute performance
La méthode d'analyse introduite dans le présent article, en référence à l'édition 2020 de la Pharmacopée de la République populaire de Chine dans la méthode d'essai de l'acyclovir,en utilisant le chromatographe liquide Wayeal de haute performance de la série LC3200 avec détecteur DAD.
1Configuration des instruments et méthode d'expérimentation
1.1 Configuration des instruments
Je ne veux pas. | Nom | Quantité utilisée |
1 | P3210Q Pompes quaternaires | 1 |
2 | CT3400 Poêle à colonne | 1 |
3 | AS3210 Autosampleur | 1 |
4 | Détecteur DAD3260 DAD | 1 |
5 | Les pièces de rechange sont utilisées pour les pièces de rechange. | 1 |
6 | Station de travail de chromatographie | 1 |
1.2 Méthode expérimentale
1.2.1 Préparation des réactifs
Tableau 2 Liste des réactifs
Je ne veux pas. | Réactifs | La pureté |
1 2 3 4 5 |
Méthanol Acide phosphorique Hydroxyde de sodium Acyclovir La guanine |
Pureté chromatographique (LC) GR MOS 98% 99% |
1.2.1.1 Solution d'essai: Prendre 40 mg d'échantillon dans une fiole de mesure de 200 ml, ajouter 2 ml d'hydroxyde de sodium à 0,4% pour le dissoudre, puis ajouter 25 ml de 0.1% (V/V) de solution d'acide phosphorique et diluer avec de l'eau jusqu'à la balanceIl faut bien secouer.
1.2.1.2 Solution de référence: Prendre 1 ml de la solution d'essai dans une fiole de mesure de 100 ml, ajouter 5 ml de solution à 0,1% d'acide phosphorique, diluer avec de l'eau à l'échelle et bien agiter.
1.2.1.3 Solution de stockage de contrôle de la guanine: Prendre 10 mg de guanine de référence dans une fiole de mesure de 50 ml, ajouter 5 ml de solution d'hydroxyde de sodium à 0,4% pour la dissoudre, puis ajouter 5 ml de 0.1% de solution d'acide phosphorique, diluer avec de l'eau à la balance, bien secouer.
1.2.1.4 Solution de référence de guanine: prendre 1 ml de solution de référence de guanine dans un flacon de 100 ml, diluer à l'eau et bien agiter.
1.2.1.5 Solution adaptée au système: Prendre une quantité appropriée de la solution de référence et de la solution de référence de guanine, mélanger en volume égal et bien agiter.
1.2.2 Condition de chromatographie
Tableau 3 Conditions de chromatographie
Colonne de chromatographie | Colonne de chromatographie Nova Atom PC18, 4,6*250 mm, 5 μm | ||
Phase mobile | Phase mobile A: eau | Phase mobile B: le méthanol | |
Taux de débit | 1 ml/min | ||
Température de la colonne | 35°C | Longueur d'onde | 254 nm |
Volume d'injection | 20 μl |
Tableau 4 Proportion de phase mobile
Temps (min) | Phase mobile A | Phase B mobile |
0 | 94 | 6 |
15 | 94 | 6 |
40 | 65 | 35 |
41 | 94 | 6 |
51 | 94 | 6 |
2Résultat de l' expérience.
2.1 Solution de l'adéquation du système
Figure 1 Chromatogramme d'essai de la solution d'adéquation du système
Tableau 5 Solution de l'adéquation du système de données d'essai
Je ne veux pas. | Composé | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro théorique de plaque | Séparation |
1 | La guanine | 5.698 | 138.675 | 17173 | 12.334 |
2 | Acyclovir | 8.425 | 139.902 | 15786 | N.a. |
Remarque: D'après le graphique ci-dessus et les données du tableau, on peut voir que l'acyclovir et la guanine ont de meilleures formes de pic et un nombre de plaques théorique élevé.0, qui répond aux exigences de la pharmacopée.
2.2 Répétabilité
Figure 2 Chromatogramme de répétabilité de 6 injections de l'adéquation du système
Tableau 6 Données de répétabilité de 6 injections de solution d'adéquation au système Temps de rétention
Échantillon | Je ne veux pas. | La guanine | Acyclovir |
Temps de conservation |
1 | 5.698 | 8.408 |
2 | 5.701 | 8.415 | |
3 | 5.705 | 8.411 | |
4 | 5.701 | 8.405 | |
5 | 5.705 | 8.401 | |
6 | 5.705 | 8.398 | |
RSD (%) | 0.048 | 0.074 |
Tableau 7 Données de répétabilité de 6 injections de solution d'adéquation du système
Échantillon | Je ne veux pas. | La guanine | Acyclovir |
Zone de pic |
1 | 136.997 | 138.836 |
2 | 138.496 | 139.117 | |
3 | 137.783 | 139.505 | |
4 | 136.663 | 138.204 | |
5 | 137.755 | 137.968 | |
6 | 137.789 | 139.374 | |
RSD (%) | 0.475 | 0.452 |
Note: Selon les données du tableau ci-dessus, le RSD du temps de rétention de la guanine et de l'acyclovir dans la solution d'adéquation au système est de 0,048% et 0,074%, et le RSD de la zone de pic est de 0,475% et 0.452 pour centLes résultats de reproductibilité sont bons et répondent aux exigences expérimentales.
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