2024-09-27
Détermination du polyéthylène glycol par chromatographie par perméation au gel
1. Introduction
Objet: Détermination du poids moléculaire et de la répartition du polyéthylène glycol (PEG) par méthode de chromatographie par perméation par gel (GPC) à haute performance.
Méthode:
Xtimate SEC-120, colonne de chromatographie par perméation par gel de 5 μm et 7,8 x 300 mm
Détecteur d'indice de réfraction différentiel (RID)
Phase mobile: eau ultrapure
Débit: 1,0 ml/min
Température de la colonne: 35 °C;
Volume d'injection: 10 μl.
Des courbes d'étalonnage sont établies et les résultats de masse moléculaire et de distribution de chaque échantillon sont calculés par un logiciel GPC.
Résultat: la linéarité du PEG est bonne lorsque le poids moléculaire est compris entre 400 et 200; la reproductibilité de l'expérience est bonne, avec 6 injections consécutives de PEG6000,la valeur RSD du temps de rétention est de 00,105%, et la valeur RSD de la zone de pic est de 0,335%.
Conclusion: la chromatographie par perméation par gel à haute performance (GPC) est une méthode fiable pour la détermination du poids moléculaire et de la répartition du PEG,qui présente les avantages d'une reproductibilité précise et élevée lorsqu'il est utilisé pour évaluer la propriété de polydispersité des composés polymères.
Mots clés: HPLC, GPC, RID, Polymère, Polyéthylène glycol
2. Méthode expérimentale
2.1 Configuration des instruments
Tableau 1 Liste des configurations du chromatographe liquide à haute performance
Je ne veux pas. | Modulaire | Quantité utilisée |
1 | Chromatographie liquide haute performance série LC3200 | 1 |
2 | Pompes binaires PB3200 | 1 |
3 | RID3300 | 1 |
4 | CT3200 Poêle à colonne | 1 |
5 | AS3200 Autosampleur | 1 |
2.2 Conditions d'essai
Colonne de chromatographie: Xtimate SEC-120,5 μm,7,8 x 300 mm
Température de la colonne: 35°C
Détecteur: RID
Taux de débit: 1,0 ml/min
Phase mobile: eau
Volume d'injection: 10 μl
2.3 Instruments/réactifs et consommables
Réactifs:
Eau ultrapure
La norme est la suivante: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Équipement auxiliaire
Balances analytiques
Unité d'extraction de solvants
Nettoyeur à ultrasons
Matériaux expérimentaux
Membrane filtrant: membrane filtrante aqueuse de 0,45 μm
2.4 Élaboration de la norme PEG
Pipette 0,20 g chacune des normes PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 et PEG20000, ajouter 10 ml d'eau à dissoudre, bien mélanger et préparer la concentration des échantillons à tester de 20 mg/ml.
3Résultats et discussions
3.1 Différentes normes de poids moléculaire
Figure 1 Chromatogramme du PEG400
Tableau 1 Paramètres chromatographiques du PEG400
Je ne veux pas. | Composés | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro de plaque théricale | Facteur de retard |
1 | PEG400 | 10.315 | 501.732 | 2346 | 1.185 |
Tableau 2 Paramètres chromatographiques du PEG2000
Je ne veux pas. | Composés | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro théorique de plaque | Facteur de retard |
1 | PEG2000 | 8.659 | 499.892 | 1926 | 1.230 |
Figure 3 Chromatogramme du PEG6000
Tableau 3 Paramètres chromatographiques du PEG6000
Je ne veux pas. | Composés | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro théorique de plaque | Facteur de retard |
1 | PEG6000 | 7.215 | 499.482 | 1.171 |
Figure 4 Chromatogramme de PEG10000
Tableau 4 Paramètres chromatographiques du PEG10000
Je ne veux pas. | Composés | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro théorique de plaque | Facteur de retard |
1 | PEG10000 | 6.612 | 483.657 | 2550 | 1.265 |
Figure 5 Chromatogramme du PEG20000
Tableau 5 Paramètres chromatographiques du PEG20000
Je ne veux pas. | Composés | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro théorique de plaque | Facteur de retard |
1 | PEG20000 | 6.081 | 497.803 | 1103 | 1.799 |
Figure 6 Chromatogrammes de chevauchement de poids moléculaire différent
Remarque: les données ci-dessus montrent que le temps de rétention de PEG20000 est de 6,081 minutes et de PEG400 de 10,315 minutes, les molécules plus grandes sont éluées en premier et les molécules plus petites sont éluées plus tard.
3.2 Répétabilité
Figure 7 Chromatogrammes de chevauchement de répétabilité de PEG6000 (n=6)
Tableau 7 Paramètres chromatographiques de répétabilité du PEG6000 (n=6)
Je ne veux pas. | Les échantillons | Temps de conservation | Zone de pic |
1 | 6000 | 7.233 | 498.821 |
2 | 6000 | 7.234 | 503.367 |
3 | 6000 | 7.225 | 499.891 |
4 | 6000 | 7.221 | 499.560 |
5 | 6000 | 7.219 | 501.374 |
6 | 6000 | 7.215 | 499.482 |
Moyenne | - | 7.225 | 500.416 |
RSD (%) | - | 0.105 | 0.335 |
Note: la répétabilité est bonne, le RSD du temps de rétention est de 0,105% et le RSD de la zone de pic est de 0,335% pour 6 injections de PEG6000.
3.3 courbes standard
Figure 8 courbes standard chromatogrammes de différents poids moléculaires
Tableau 8 Curves standard Paramètres chromatographiques de différents poids moléculaires
Remarque: les résultats du poids moléculaire et de la distribution de chaque échantillon sont calculés par un logiciel GPC.000, et le coefficient de corrélation linéaire est 0.999.
4Conclusion
Cet essai du polyéthylène glycol (PEG) est effectué par chromatographie au gel à l'aide d'un chromatographe liquide de haute performance de la série LC3200 avec détecteur d'indice de réfraction différentiel.le temps de rétention de PEG20000 est de 6La répétabilité est bonne. Le RSD du temps de rétention est de 0.105% et la RSD de la zone de pic est de 0.335% pour 6 injections de PEG6000. la linéarité du poids moléculaire de PEG est bonne dans la gamme de 400 à 20,000, et le coefficient de corrélation linéaire est 0.9999La chromatographie par perméation par gel à haute performance (GPC) est une méthode fiable pour la détermination du poids moléculaire et de la répartition du PEG.qui présente les avantages de résultats précis et reproductibles lorsqu'il est utilisé pour évaluer la propriété de polydispersité des composés polymères.
Remarque: l'échantillon doit être laissé à température ambiante pendant plus de 12 heures et mélangé doucement, sans utiliser d'ultrasons ni agiter fortement pour accélérer la dissolution.
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