Détermination des résidus d'antibiotiques quinolones dans la viande de poulet par le système de chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem LCMS-TQ9200 de Wayeal (LC-MS/MS)
La norme nationale chinoise de sécurité alimentaire "GB 31650-2019 Limites maximales de résidus pour les médicaments vétérinaires dans les aliments" spécifie les limites maximales de résidus (LMR) de certains antibiotiques quinolones dans les produits alimentaires d'origine animale. De plus, la norme "GB 31658.17-2021 Norme nationale de sécurité alimentaire - Détermination des résidus de tétracyclines, de sulfonamides et de quinolones dans les aliments d'origine animale par chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem" spécifie la méthode analytique LC-MS/MS et les limites de quantification (LOQ) correspondantes pour 13 antibiotiques quinolones. Cette note d'application présente les résultats validés avec succès pour l'analyse de 13 résidus d'antibiotiques quinolones dans la viande de poulet en utilisant le système de chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem à triple quadripôle LCMS-TQ9200 de Wayeal (LC-MS/MS).
Mots-clés : LC-MS/MS, quinolones, résidus de médicaments vétérinaires, sécurité alimentaire.
Système de chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem Wayeal LCMS-TQ9200
Méthode de chromatographie liquide
Colonne de chromatographie : C18 3,0x100 mm
Phase mobile : A : acide formique à 0,1 % dans le méthanol, B : solution d'acide formique à 0,1 %
Débit : 0,4 mL/min
Température de la colonne : 45 °C
Volume d'injection : 3 µL
Méthode de spectrométrie de masse
Tableau 1 Paramètres de la source d'ions de spectrométrie de masse
| Source d'ions |
ESI, mode ion positif |
| Tension de la source d'ions |
5500 V |
| Débit de gaz de désolvatation |
18 000 mL/min |
| Débit de gaz de nébulisation |
2000 mL/min |
| Débit de gaz de gaine |
5000 mL/min |
| Débit de gaz de collision |
800 µL/min |
| Température de désolvatation |
450 °C |
| Température du gaz de gaine |
150 °C |
Tableau 2 Paramètres de spectrométrie de masse pour chaque composé
| Plage linéaire |
Q1 |
Q3 |
Potentiel de déclusterisation (V) |
Énergie de collision (V) |
| 111,26 |
262,1 |
244* |
100 |
25 |
| 160 |
100 |
50 |
| 59,64 |
262,1 |
202 |
115 |
44 |
| 244,1* |
115 |
24 |
| 70,16 |
320,1 |
302,1* |
90 |
27 |
| 233,2 |
90 |
33 |
| 23,74 |
321,2 |
234 |
100 |
38 |
| 303* |
100 |
30 |
| 37,91 |
332,2 |
231 |
100 |
49 |
| 288 |
100 |
25 |
| 28,70 |
334,1 |
316* |
110 |
29 |
| 233,2 |
110 |
35 |
| 48,54 |
352,1 |
265,1* |
110 |
31 |
| 334 |
110 |
29 |
| 105,74 |
358,1 |
340,1* |
100 |
32 |
| 283,1 |
100 |
32 |
| 35,97 |
360,2 |
316,1 |
110 |
27 |
| 245,1* |
110 |
38 |
| 51,67 |
362,1 |
318,3 |
75 |
25 |
| 261,2* |
75 |
34 |
| 190,11 |
363,2 |
72,1* |
100 |
25 |
| 345,2 |
100 |
29 |
| 38,11 |
386,1 |
299,1* |
110 |
38 |
| 342 |
110 |
27 |
| 25,85 |
400,2 |
299,1 |
110 |
38 |
| 382,2 |
120 |
30 |
Remarque : L'ion marqué d'un * est l'ion quantitatif
1. Résultat de l'expérience
1.1 Forme des pics
La détermination de 13 antibiotiques quinolones a été réalisée en moins de 11 minutes. Tous les pics présentaient de bonnes formes sans le phénomène courant de traînée des antibiotiques quinolones. Tous les composés ont démontré de fortes réponses de signal, répondant aux exigences de quantification expérimentale.Fig. 1 Chromatogramme de 13 antibiotiques quinolones
1.2. Plage linéaire
Une quantité appropriée de solution standard mixte de quinolones a été diluée en série pour préparer des étalons d'étalonnage couvrant des concentrations de 2 à 500 ng/mL. L'évaluation de la linéarité a démontré une excellente concordance avec les concentrations nominales, avec tous les écarts dans l'erreur maximale admissible. Le coefficient de détermination (R²) variait de 0,9921 à 0,9998, confirmant une linéarité satisfaisante pour tous les composants.
Tableau 3 Tableau de la plage linéaire
Composés
| Plage linéaire |
Coefficient de corrélation linéaire R |
2Acide oxolinique |
| 111,26 |
0,9973 |
Ciprofloxacine |
| 59,64 |
0,9973 |
Norfloxacine |
| 70,16 |
0,9973 |
Énoxacine |
| 23,74 |
0,9973 |
Ciprofloxacine |
| 37,91 |
0,9973 |
Péfloxacine |
| 28,70 |
0,9973 |
Loméfloxacine |
| 48,54 |
0,9973 |
Danofloxacine |
| 105,74 |
0,9973 |
Enrofloxacine |
| 35,97 |
0,9973 |
Ofloxacine |
| 51,67 |
0,9973 |
Marbofloxacine |
| 190,11 |
0,9973 |
Sarafloxacine |
| 38,11 |
0,9973 |
Difloxacine |
| 25,85 |
0,9973 |
Fig. 2 Résultats de la plage linéaire pour les antibiotiques quinolones sélectionnés |
1.3. Limite de détection (LOD) et limite de quantification (LOQ)
La norme nationale de sécurité alimentaire GB 31658.17-2021 spécifie une limite de détection (MDL) de 2 µg/kg et la limite de quantification (MQL) de 10 µg/kg. Dans cette méthode, tous les composés cibles ont démontré des rapports signal/bruit significativement supérieurs à 3 à 2 µg/kg et à 10 à 10 µg/kg, ce qui est entièrement conforme aux exigences de sensibilité spécifiées dans la norme nationale.
Tableau 4 Rapports signal/bruit pour les limites de détection et de quantification des composés cibles
Composé
| SNR (S/N) |
2 µg/kg |
| 10 µg/kg |
Acide oxolinique |
| 111,26 |
359,11 |
Fluméquine |
| 59,64 |
244,73 |
Norfloxacine |
| 70,16 |
392,57 |
Énoxacine |
| 23,74 |
80,26 |
Ciprofloxacine |
| 37,91 |
99,26 |
Péfloxacine |
| 28,70 |
125,81 |
Loméfloxacine |
| 48,54 |
165,84 |
Danofloxacine |
| 105,74 |
348,10 |
Enrofloxacine |
| 35,97 |
120,82 |
Ofloxacine |
| 51,67 |
287,26 |
Marbofloxacine |
| 190,11 |
399,38 |
Sarafloxacine |
| 38,11 |
160,79 |
Difloxacine |
| 25,85 |
149,29 |
Fig. 3 Chromatogrammes LOD/LOQ pour les quinolones sélectionnées |
1.4. Test de précision
Une solution standard mixte d'antibiotiques quinolones à trois concentrations (10, 50 et 100 ng/mL) a été injectée 6 fois pour comparer les variations du temps de rétention et de l'aire des pics. Comme le montre le tableau ci-dessous, tous les composés quinolones testés ont démontré des écarts de temps de rétention inférieurs à 0,3 % et des écarts d'aire de pic inférieurs à 5 %, ce qui est entièrement conforme à l'exigence de la norme nationale de RSD ≤ 15 % pour la précision.
Tableau 5 Test de précision de divers composés
Fig. 4 Chromatogrammes de précision des composés sélectionnés
2. Conclusion
Cette méthode a utilisé le système de chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem Wayeal LCMS TQ9200 pour la détermination des antibiotiques quinolones dans des échantillons de poulet. Les données expérimentales ont démontré d'excellentes performances chromatographiques avec des formes de pics bien définies et l'absence de traînée pour tous les analytes, tout en répondant aux exigences de sensibilité spécifiées dans les normes nationales. La méthode a présenté une bonne linéarité avec des coefficients de corrélation (R²) supérieurs à 0,99 pour toutes les courbes d'étalonnage, ainsi qu'une excellente reproductibilité, comme en témoignent les écarts de temps de rétention inférieurs à 0,3 % et les variations d'aire de pic inférieures à 5 %. L'analyse de trois lots d'échantillons de poulet préparés indépendamment n'a révélé aucun résidu détectable d'antibiotiques quinolones. Ces résultats confirment que la méthode analytique couplée au système Wayeal LC-MS/MS est parfaitement capable de répondre aux exigences de détection qualitative et quantitative de routine pour les analytes cibles dans les échantillons de test.
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