Détermination de l'oxalate dans l'injection de gluconate de calcium à l'aide d'une colonne de chromatographie ionique NovaChrom

Le gluconate de calcium est un sel de calcium organique largement utilisé dans les produits alimentaires et pharmaceutiques, principalement pour la supplémentation en calcium et le traitement des carences en calcium. Au cours des processus d’oxydation, de fermentation et de dégradation, le glucose peut produire une petite quantité d’acide oxalique comme sous-produit. La combinaison de l'acide oxalique avec le calcium réduit directement la biodisponibilité des suppléments de calcium, entraînant une diminution de l'efficacité de la supplémentation en calcium. Un excès d'acide oxalique peut déclencher une hypocalcémie, entraînant des anomalies de l'excitabilité neuromusculaire et des arythmies cardiaques. Ces risques sont particulièrement critiques pour les patients recevant une administration intraveineuse et nécessitent donc des mesures strictes de prévention et de contrôle. Par conséquent, la teneur en acide oxalique du gluconate de calcium constitue l’un des indicateurs de qualité importants pour évaluer la qualité du produit. Dans le projet de norme révisé duPharmacopée chinoise(édition 2025) par la Commission chinoise de pharmacopée, la détermination de l'oxalate a été ajoutée au projet de norme pour le gluconate de calcium.

Dans cette étude, une colonne de chromatographie anionique à base de carbonate NovaChrom (CS-5A-P4, 4,0×250 mm), a été utilisé pour la détermination de l'oxalate dans l'injection de gluconate de calcium. La procédure de test est simple et les résultats sont stables et répondent pleinement aux exigences analytiques. Cela fournit une référence fiable pour la détermination de l’oxalate dans l’injection de gluconate de calcium par chromatographie ionique.

Mots-clés :colonne de chromatographie ionique ;Pharmacopée chinoise; glucose; colonne de chromatographie anionique ; injection de gluconate de calcium ; acide oxalique.

1. Expérimentez

1.1 Instrument principal et réactifs

Chromatographie ionique : Chromatographie ionique Wayeal équipée d'un détecteur de conductivité.

Colonne de chromatographie anionique : CS-5A-P4, 4.0×250 millimètres

Colonne de garde anionique : HS-5AG, 4×30 millimètres

Oxalate de sodium : qualité électronique

Une marque commerciale d'injection de gluconate de calcium

Seringue jetable (2 ml)

Filtre pour seringue aqueuse (0,45µm)

Adéquation du système : le nombre de plaques théorique calculé à partir du pic d'oxalate ne doit pas être inférieur à 2 500 et le facteur de traînée ne doit pas être supérieur à 1,2.

1.2 Prétraitement des échantillons

1.2.1 Solution de référence

Prendre une quantité appropriée d'oxalate de sodium, la peser avec précision, la dissoudre et la diluer quantitativement avec une solution d'acide chlorhydrique (1→1200) pour produire une solution contenant environ 1,5µg d'oxalate de sodium pour 1 ml (équivalent à environ 1µg d'oxalate pour 1 ml).

1.2.2 Solution d'essai

Prélever une quantité appropriée de ce produit, la peser avec précision, la dissoudre et la diluer quantitativement avec une solution d'acide chlorhydrique (1→1200) pour produire une solution contenant environ 20 mg pour 1 ml.

1.3 Conditions de travail des instruments

Température de la colonne chromatographique : 30°C

Température de la cellule de conductivité : 35°C

Éluant : carbonate de sodium 5,0 mM + bicarbonate de sodium 1,0 mM

Débit : 1,0 mL/min

Volume d'injection : 50µL

2. Résultats et discussion

2.1 Test de la solution de référence

La solution de référence après prétraitement selon la méthode de préparation des échantillons décrite dans la section 1.2 a été injectée dans le système et analysée dans les conditions instrumentales spécifiées dans la section 1.3. Le chromatogramme de test est présenté sur la figure 1 et les résultats des tests sont présentés dans le tableau 1 ci-dessous.

Fig 1 Chromatogramme de la solution de référence

Tableau 1 : Résultats des tests de la solution de référence

Remarque : Le nombre de plaques théorique calculé à partir du pic d’oxalate était de 9 842 et le facteur de queue était de 1,163.

2.2 Test de la solution échantillon

La solution échantillon après prétraitement selon la méthode de préparation d'échantillon décrite dans la section 1.2 a été injectée dans le système et analysée dans les conditions instrumentales spécifiées dans la section 1.3. Le chromatogramme de test est présenté sur la figure 2 et les résultats des tests sont présentés dans le tableau 2.

Fig 2 Chromatogramme de la solution échantillon

Tableau 2 Résultats des tests de la solution échantillon

Remarque : Le nombre de plaques théorique calculé à partir du pic d’oxalate était de 8 827 et le facteur de queue était de 1,119.

2.3 Test de répétabilité

Fig 3 Chromatogrammes de la solution de référence pour 6 injections consécutives

Fig 4 Chromatogrammes de la solution échantillon pour 6 injections consécutives

Tableau 3 Données de test

Remarque : Les valeurs RSD du temps de rétention pour la solution échantillon et la solution de référence allaient de 0,027 % à 0,113 %, et les valeurs RSD de la surface du pic allaient de 0,426 % à 0,505 %.

3. Conclusion

La colonne de chromatographie anionique à base de carbonate NovaChrom (CS-5A-P4, 4.0×250 mm) couplé au chromatographe ionique Wayeal a été appliqué avec succès à la détermination de l'oxalate dans l'injection de gluconate de calcium. La méthode a démontré une grande précision, une bonne résolution, une répétabilité stable et une sensibilité élevée. Tous les résultats répondaient aux critères d'adéquation du système spécifiés dans lePharmacopée chinoise, avec un nombre de plaques théorique supérieur à 2 500 et des facteurs de queue inférieurs à 1,2 pour le pic d'oxalate.