Analyse de l'advantame dans les aliments par chromatographie liquide à haute performance

Analyse de l'Advantame dans les additifs alimentaires

Cette expérience a été menée en référence à la "GB 1886.377-2024 Norme nationale de sécurité alimentaire - Additif alimentaire Advantame", en utilisant le système de chromatographie liquide haute performance (HPLC) série LC3200 de Wayeal équipé d'un détecteur UV pour l'analyse. Les résultats expérimentaux ont démontré une excellente adéquation du système, avec une bonne forme de pic pour l'acide benzoïque et l'advantame. Il n'y a pas d'autres pics autour des pics cibles, et les nombres de plateaux théoriques élevés ont confirmé la conformité à toutes les exigences de test. Le coefficient de corrélation linéaire a dépassé 0,999. L'expérience a montré une excellente répétabilité, avec des écarts types relatifs (RSD) du temps de rétention de 0,027 % pour l'acide benzoïque et de 0,049 % pour l'advantame, et des RSD de l'aire des pics de 0,184 % et 0,133 %, respectivement. Les limites de détection théoriques sont de 0,066 mg/L pour l'acide benzoïque et de 0,113 mg/L pour l'advantame. Aucun analyte cible n'a été détecté dans le test d'échantillon. Toutes les données analytiques ont satisfait aux exigences de performance instrumentale spécifiées dans la méthodologie de la pharmacopée.

Mots-clés : Advantame, chromatographie liquide haute performance, détecteur UV.

1. Méthode expérimentale

1.1 Configuration de l'instrument

Tableau 1 Liste de configuration du système HPLC

1.2 Matériels expérimentaux et équipements auxiliaires

Acétonitrile : qualité chromatographique

Étalon d'acide benzoïque

Étalon d'advantame

1.3 Conditions de test

Tableau 2 Conditions d'analyse HPLC

1.4 Préparation de la solution

1.4.1 Solution d'étalon interne

Peser avec précision 40 mg d'acide benzoïque, dissoudre dans un solvant mixte eau-acétonitrile et diluer précisément à 50 mL.

1.4.2 Solution standard

Peser avec précision 40 mg d'advantame, dissoudre dans un solvant mixte eau-acétonitrile et diluer précisément à 50 mL pour préparer une solution mère standard de 0,8 mg/mL. Prélever avec précision 8 mL, 9 mL, 10 mL, 11 mL et 12 mL de la solution mère standard dans cinq ballons jaugés séparés. Ajouter 5 mL de solution d'étalon interne à chaque ballon, puis diluer à 50 mL avec un solvant mixte eau-acétonitrile pour préparer des solutions de travail standard à des concentrations de 0,128 mg/mL, 0,144 mg/mL, 0,160 mg/mL, 0,176 mg/mL et 0,192 mg/mL pour la construction de la courbe d'étalonnage.

1.4.3 Préparation de l'échantillon

Peser avec précision 40 mg de l'échantillon test, dissoudre dans un solvant mixte eau-acétonitrile et diluer précisément à 50 mL. Prélever 10 mL de la solution préparée dans un ballon jaugé, ajouter 5 mL de la solution d'étalon interne et diluer à 50 mL avec un solvant mixte eau-acétonitrile. Filtrer la solution à travers un filtre membranaire pour le test.

2. Résultats et discussion

2.1 Adéquation du système

Figure 1 Chromatogramme du test d'adéquation du système

Tableau 3 Données du test d'adéquation du système

Remarque : Comme le montre le tableau ci-dessus, le test d'adéquation du système a montré d'excellentes formes de pic pour l'acide benzoïque et l'advantame, avec des facteurs de traînée inférieurs à 1,2. La résolution a dépassé 1,5 et les nombres de plateaux théoriques élevés ont pleinement satisfait aux exigences de la méthode analytique.

2.2 Test de la courbe d'étalonnage

Fig 2 Rapport de test de la courbe d'étalonnage de l'advantame

Noté : Les résultats expérimentaux ont démontré une excellente linéarité pour la quantification de l'advantame, avec un coefficient de corrélation (R²) supérieur à 0,999, ce qui satisfait aux exigences de l'expérience.

2.3 Test de répétabilité

Fig 3 Chromatogramme du test de répétabilité à six injections

Tableau 4 Données du test de répétabilité de l'acide benzoïque (6 injections)

Tableau 5 Données du test de répétabilité de l'advantame (6 injections)

Remarque : D'après les données du tableau ci-dessus, la répétabilité du temps de rétention de l'acide benzoïque et de l'advantame est de 0,027 % et 0,049 %, et la répétabilité de l'aire du pic est de 0,184 % et 0,133 %, respectivement, ce qui montre une bonne répétabilité.

2.4 Test de la limite de détection

Fig. 4 Chromatogramme de la solution standard d'acide benzoïque à 0,8 mg/L et d'advantame à 1,28 mg/L

Tableau 6 Résultats des tests pour la solution standard d'acide benzoïque à 0,8 mg/L et d'advantame à 1,28 mg/L contenant

Remarque : Selon les données de l'échantillon standard dans le tableau ci-dessus, avec une concentration d'acide benzoïque de 0,8 mg/L et une concentration d'advantame de 1,28 mg/L, les limites de détection théoriques pour l'acide benzoïque et l'advantame, calculées sur la base d'un rapport signal/bruit de 3 fois, sont respectivement de 0,066 mg/L et 0,113 mg/L.

2.5 Test d'une boisson de marque

Fig 5 Chromatogramme de la boisson de marque A

Remarque : Aucun advantame n'a été détecté dans la boisson de marque testée.

3. Conclusion

Cette expérience a été menée conformément à la "GB 1886.377-2024 Norme nationale de sécurité alimentaire - Additif alimentaire Advantame" en utilisant le système de chromatographie liquide haute performance Wayeal LC3200, équipé d'un détecteur UV pour l'analyse. Les résultats expérimentaux ont démontré une excellente adéquation du système, avec une bonne forme de pic pour l'acide benzoïque et l'advantame. Il n'y a pas d'autres pics autour des pics cibles, et les nombres de plateaux théoriques élevés ont confirmé la conformité à toutes les exigences de test. Le coefficient de corrélation linéaire a dépassé 0,999. L'expérience a montré une excellente répétabilité, avec des écarts types relatifs (RSD) du temps de rétention de 0,027 % pour l'acide benzoïque et de 0,049 % pour l'advantame, et des RSD de l'aire des pics de 0,184 % et 0,133 %, respectivement. Les limites de détection théoriques sont de 0,066 mg/L pour l'acide benzoïque et de 0,113 mg/L pour l'advantame. Aucun analyte cible n'a été détecté dans le test d'échantillon. Toutes les données analytiques ont satisfait aux exigences de performance instrumentale spécifiées dans la méthodologie de la pharmacopée.