2024-10-22
Détermination de la 6-méthylcoumarine dans les cosmétiques par chromatographie liquide
1.1 Configuration des instruments
Tableau 1 Liste des configurations de la chromatographie liquide
| Je ne veux pas. | Module | Quantité utilisée |
| 1 | Pompes binaires PB3210 | 1 |
| 2 | CT3400 Poêle à colonne | 1 |
| 3 | AS3210 Autosampleur | 1 |
| 4 | Détecteur UV3210 | 1 |
| 5 | Pour les appareils de traitement de l'air, les caractéristiques suivantes doivent être respectées: | 1 |
| 6 | Station de travail SmartLab | 1 |
1.2 Méthode expérimentale
1.2.1 Réactifs
Tableau 2 Liste des réactifs
| Je ne veux pas. | Réactifs | La pureté |
| 1 | Méthanol | Grade chromatographique |
| 2 | 6-méthylcoumarine | 99% |
| 3 | Phosphate de dihydrogène d'ammonium | R.A. |
| 4 | Acide phosphorique | GR |
1.2.1.1 solution de base de 6-méthylcoumarine (1000 mg/l): Prendre une quantité appropriée de 6-méthylcoumarine standard,dissous et fixés en volume avec du méthanol et préparés en solution de base standard à une concentration de 1000 mg/l.
1.2.1.2 Solution de travail standard de 6-méthylcoumarine:Pipettez une quantité appropriée de 6-méthylcoumarine en solution de base standard et diluez-la avec du méthanol pour préparer une série de courbes de travail à des concentrations de 0.1 mg/l, 0,5 mg/l, 1,0 mg/l, 3,0 mg/l, 5,0 mg/l et 10,0 mg/l respectivement.
1.2.1.3 Solution tampon de phosphate de dihydrogène de sodium: Prendre 3,12 g de phosphate de dihydrogène de sodium, ajouter de l'eau pour dissoudre et diluer à 1000 ml, puis ajuster le pH de l'acide phosphorique à 3.5.
1.2.2 Conditions de chromatographie
Tableau 3 Conditions de chromatographie
| Colonne de chromatographie | Pour les appareils de traitement de l'air, les caractéristiques suivantes doivent être respectées: | ||
| Phase mobile | A: méthanol,B:dihydrogène phosphate de sodium solution tampon | ||
| Taux de débit | 1 ml/min | ||
| Température de la colonne | 35°C | Longueur d'onde | 275 nm |
| Volume d'injection | 10 μl | ||
Tableau 4 Programme d'élution par gradient
| Temps (min) | Phase mobile A | Phase B mobile |
| 0 | 55 | 45 |
| 11 | 55 | 45 |
| 12 | 90 | 10 |
| 40 | 90 | 10 |
| 41 | 55 | 45 |
| 50 | 55 | 45 |
1.2.3 Pré-traitement des échantillons
Prenez 1 g (à 0,001 g de précision) de l'échantillon dans un flacon volumétrique de 10 ml, ajoutez 5 ml de méthanol, tourbillonnez et agitez pour mélanger complètement l'échantillon avec la solution d'extraction, extraction par ultrasons pendant 20 min,refroidi à température ambiante, puis fixé au volume de 10 ml avec du méthanol, mélangé puis transféré dans des tubes centrifuges, centrifugé à 5000 r/min pendant 5 min,et le supernatant filtré à travers le 0.45 μm membrane organique, puis à tester.
2Résultat de l' expérience.
2.1 Adaptation du système
Figure 1 Chromatogramme des normes de 10 mg/l
Tableau 5 Données d'essai des normes de 10 mg/l
| Composés | Temps de conservation | Zone de pic | Numéro théorique de plaque |
| 6-méthylcoumarine | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Note:Le chromatogramme et les données montrent que la 6-méthylcoumarine a une bonne forme de pic, qu'il n'y a pas d'autres pics autour du pic cible et que le nombre de plaques théoriques est élevé,qui répond aux exigences expérimentales.
2.2 courbe standard
Figure 2 Résultat de l'essai de la courbe standard
Note: le chromatogramme montre que la valeur R du coefficient de corrélation de la courbe de 6-méthylcoumarine est supérieure à 0.9999, qui répond aux exigences expérimentales.
2.3 Répétabilité
Figure 3 Chromatogramme de répétabilité de 3 mg/ L Normes de 6 injections
Tableau 6 Données de répétabilité de 3 mg/ L Normes de 6 injectionss
|
6-méthylcoumarine |
Je ne veux pas. | Temps de conservation | Zone de pic |
| 1 | 11.159 | 177.710 | |
| 2 | 11.161 | 176.711 | |
| 3 | 11.142 | 177.128 | |
| 4 | 11.152 | 176.985 | |
| 5 | 11.150 | 177.469 | |
| 6 | 11.149 | 177.629 | |
| RSD (%) | 0.061 | 0.222 |
Note: Selon les données du tableau ci-dessus, la DRS de la répétabilité en temps de rétention de la 6-méthylcoumarine est de 0,061%, et la DRS de la répétabilité en zone de pic est de 0,222%.La répétabilité est bonne et répond aux exigences expérimentales.
2.4 Limites de détection
Figure 4 Chromatogramme d'essai de 0,02 mg/l selon les normes
Tableau 7 Données d'essai de 0,02 mg/l
| Composés | Temps de conservation | Zone de pic | RNN |
| 6-méthylcoumarine | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Note: Selon les données ci-dessus, le rapport signal/bruit est calculé à 3 fois la limite de détection, et il a été constaté que la limite de détection de la 6-méthylcoumarine est de 0,004 mg/L.Il répond aux exigences expérimentales.
2.5 Résultat de l'essai d'un échantillon cosmétique
Figure 5 Chromatogramme d'essai d'un échantillon de produit cosmétique
Note: la 6-méthylcoumarine n'a pas été détectée dans un échantillon de produit cosmétique.
2.6 Attention
Lorsque vous utilisez une centrifugeuse à grande vitesse, veillez à ce que les tubes soient placés symétriquement et que la masse totale des tubes des côtés opposés soit la même.
3Conclusion
La méthode d'analyse introduite dans le présent article, en référence aux Normes techniques et de sécurité pour les cosmétiques pour la détection de la 6-méthylcoumarine,en utilisant la chromatographie liquide à haute performance Wayeal série LC3200 avec détecteur UVLe résultat de l'expérience montre que la forme du pic de 6-méthylcoumarine est bonne dans le test d'adaptabilité du système et qu'il n'y a pas d'autres pics autour du pic cible.et le nombre théorique de plaques est élevéLe coefficient de corrélation de la courbe R est supérieur à 0.9999Le RSD de la répétabilité en temps de rétention de la 6-méthylcoumarine est de 0,061%, et le RSD de la répétabilité en zone de pic est de 0,222%, ce qui montre une bonne répétabilité..004 mg/l. Tous les résultats des essais ci-dessus satisfont aux exigences de l'instrument selon la méthode standard.
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